Quan phổ kế, máy đo quang UV-VIS (tử ngoại khả kiến)

1. BÀI THU HOẠCH:
TÌM HIỂU VỀ MÁY QUANG PHỔ KẾ UV-VIS
Giảng viên hướng dẫn:
PGS.TS Lê Thanh Hà
Thành viên nhóm:
Chu Văn Oai 20152802
Hoàng Thị Ngọc Trang 20153865
Trần Lương Nguyên 20152733
Lê Thị Nhung 20152778

2. Phụ lục: I • KHÁI QUÁT CHUNG
II • CẤU TẠO
III • NGUYÊN LÝ
IV • ỨNG DỤNG

3. I.Khái quát chung
1.Máy quang phổ
Quang phổ kế là các thiết bị dựa trên phân tích quang phổ của ánh
sang nhằm thu được các thông tin về thành phần, tính chất hay trạng
thái của khối vật chất liên quan tới chùm ánh sáng đó

4. -Năm 1854 nhà hóa học Busen người Đức và
Kirchoff đã phát minh ra phương pháp phân tích
bằng quang phổ hấp thụ nhiệt của một số hợp
chất hữu cơ
Lịch sử ra đời

5. -Phân tích quang phổ có 2
dạng cơ bản:
• Quang phổ của ánh sáng
do vật phát ra khi nung
nóng hoặc vốn có như
Mặt Trời ,Vì sao
Quang phổ
phát xạ
• Dùng ánh sang chiếu rọi
vào vật chất và quan sát
phần ánh sang đã phản
xạ qua mẫu vật
Quang phổ
hấp thụ

6. Hãng máy:GENEQUANT ® 1300
SPECTROPHOTOMETER
CODE NO: 80-2120-00
Sản xuất tại Mỹ
Đặc điểm ,tính năng:
- Được thiết kế để đo nồng độ, độ tinh khiết của
axit nucleic và các mẫu protein,mật độ vi khuẩn
nuôi cấy ở một phạm vi rộng các thể tích mẫu.
- Ba năm đèn bảo hành
- Lớn, dễ đọc hiển thị đồ họa.
- Tùy chọn tích hợp dữ liệu máy in hoặc ra thông
qua USB vào máy tính để in ấn hoặc lưu trữ..
- Cũng có thể được vận hành từ một máy tính
với phần mềm Datrys tùy chọn.

7. II.Cấu tạo
Đèn
Bộ phận tán sắc
Cuvet
Detector
Amplifier
Màn
Khẩu độ điều chỉnh được

8. Buồng đo mẫu

9. 1. Bộ cấp nguồn
sáng

10. 2. Bộ phận
tán sắc

11. 4.Detector
Hiện tượng quang điện là hiện tượng một số electron
bứt ra khỏi bề mặt kim loại khi được kích thích bằng
ánh sáng thích hợp.

12. 3.Cuvet

13. III.Nguyên tắc
hoạt động

14. Định luật Lambert beer

15. Ứng dụng của định luật Lambert Beer
trong phân tích
-Lập đường chuẩn (A-C): quan hệ nồng độ và độ hấp thụ
dung dịch chất tan
-Xác định nồng độ chất tan C

16. Nguyên tắc chung
1st step
Đo với mẫu
chuẩn
2nd step
Đo với các
mẫu cần phân
tích
3rd step
Tính toán độ
truyền qua T=
I/I0 và độ hấp
phụ A= -Log T

17. Quy trình đo (phương pháp Lowry)
1. Chuẩn bị dịch đo
 Xây dựng đường chuẩn
 Dung dịch chuẩn
 Dung dịch protein tinh khiết ở các nồng độ
 Dung dịch mẫu vật cần phân tích
 Dịch nghiên cứu
 Dịch kiểm chứng

18. 2. Thao tác trên máy

22. Lưu ý khi sử dụng máy
 Cuvet phải đạt tiêu chuẩn
 Chiều đặt cuvet
 Lau cuvet trước khi đo

23. Ưu điểm, nhược điểm
A,Ưu điểm
• Ứng dụng tích hợp cho mật độ tế bào, axit nucleic, protein và động học enzyme
• Dải bước sóng 190 đến 1100nm, với quét bước sóng từ 200 đến 900nm được thực hiện trong vòng chưa đầy 5 giây
• Kiểm tra bằng mắt thường quét axit nucleic có thể xác định sự có mặt của tạp chất đặc biệt hữu ích với các mẫu RNA
• Lưu trữ cho 90 phương pháp do người dùng xác định với (tùy chọn) bảo vệ mật khẩu
• Màn hình đồ họa lớn, dễ đọc
• Quang học không có bộ phận chuyển động cho năng lượng năng lượng cao kết hợp với bóng đèn Xenon có tuổi thọ
cao
• Tùy chọn tích hợp máy in hoặc dữ liệu đầu ra thông qua USB tới máy PC để in hoặc lưu trữ
• Kết nối bluetooth không dây (tùy chọn)
• Có thể được sử dụng với nhiều cuvettes hoặc mao mạch cho các thể tích mẫu từ 3μL đến 2mL
B ,Nhược điểm
• Giá thành đắt
• Là thiết bị tia đơn

24. Đo nồng độ Đo hoạt độ enzym
Độ tinh khiết của tế
bào và mật độ tế bào
Nhận biết các chất
Ứng dụng

25. Phương pháp phân tích đo quang UV - VIS được ứng dụng rộng rãi trong công nghệ để xác định
trong các mẫu bột mì (hàm lượng Fe), mẫu thịt (phân tích hàm lượng nitrat, nitrit)...
Đối tượng nghiên cứu Chất cần phân tích Thuốc thử
Chất kháng sinh Clotetraxyclin Thuốc thử Th
Chất kháng sinh Streptomyxin Axit picric
Chất kháng sinh Penixilin Hydrocylamin, Fe
Các hocmon Cortison Phenylhidrazin, H2SO4
Bột mỳ Fe o-phenantrolin
Thịt Nitrit a-naphtylamin, ax-sunfunilic
Thịt Nitrat Bruxin ancaloit
Ứng dụng trong công nghệ

26. Máy đo quang phổ UV -VIS
(AGILENT )
• Một số máy đo quang phổ UV - VIS
Máy đo quang phổ UV-VIS
GeneQuant1300
Máy đo quang phổ UV-VIS
(HITACHI)

27. Sự khác nhau giữa các máy và các hãng được quyết định
bởi các yếu tố
• Độ nhạy
• Độ bền của bóng ( số giờ chiếu sáng)
• Kính lọc
• Sự tiện nghi các hình thức dẫn truyền trong máy tính

28. Những gì bạn sẽ đo, và những gì bạn sẽ cần để đo được nó?
Bạn cần chính xác và chuẩn xác đến mức độ nào và trong khoảng phạm vi bước sóng và
độ hấp thụ bao nhiêu?
Bạn sẽ được xử lý chỉ là một số ít hay nhiều mẫu tại một lần?
Thiết bị tia đôi hay tia đơn?
Ngân sách của bạn thế nào?
Giao diện người dùng và ứng dụng
Cân nhắc khi mua

29. Danh mục tài liệu tham khảo
- http://biochromspectros.com/spectrophotometers/genequant-1300-
cat/genequant-1300-spectrophotometer.html
- Trần Tứ Hiếu (2008) “Phân tích trắc quang”, NXB ĐHQG Hà Nội.
- Phạm Luận (2006), “Phương pháp phân tích phổ nguyên tử”, NXB
ĐHQGHN.
- http://www.perkinelmer.com/category/uv-vis-spectroscopy-
uv?gclid=Cj0KEQjwnsPGBRDo4c6RqK-
Oqu8BEiQAwNviCeNNO1qFoZAUbjntsBd_yGVsDyL4t6bvuBVRsvEb_NI
aAmGT8P8HAQ